ELISA試劑盒的基本檢測(cè)原理簡介

 　　ELISA試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與頭一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長450nm處測(cè)量O.D.值，按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株，O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。